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          依賴于DNA的RNA聚合酶與體外轉錄的研究——Ⅱ.酵母變異株20B-12 RNA聚合酶B的純化及鑒定


          【發布日期】:2017-12-19  【來源】:菌物學報
          【作者】張渝英;劉年娟;帥克;楊開宇;
          【機構】中國科學院微生物研究所;中國科學院微生物研究所;北京;北京;北京師范大學84屆畢業生;
          【摘要】從酵母變異株20B-12經過超聲波處理、硫酸銨沉淀、DEAE纖維素、磷酸纖維素和DEAE-Sephadex層析等步驟,純化依賴于DNA的RNA聚合酶B,在聚丙烯酰胺凝膠電泳中呈二條有聚合酶B活力的區帶。其中不含有DNase、RNase和蛋白酶活力,無內源DNA。50μg/ml的α-鵝膏蕈堿抑制聚合酶活力達90%以上。最適(NH4)2SO4濃度為40mM。最適Mn2+濃度為2mM。Mg2+對酶B無激活作用。變性DNA對酶B較天然DNA有更高的效率。 
          【關鍵詞】依賴于DNA的RNA聚合酶;釀酒酵母變異株20B-12;RNA聚合酶的純化;
           
           
           
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