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          赤霉菌原生質體DNA轉化


          【發布日期】:2018-01-15  【來源】:菌物學報
          【作者】朱平 楊金玲 朱慧新 程克棣
          【機構】中國醫學科學院;中國協和醫科大學藥物研究所;衛生部天然藥物生物合成重點實驗室;
          【摘要】雷丸(OmphalialapidescensSchroct.)經過Tris-HCl緩沖液浸提,硫酸銨分級沉淀,離子交換,卵粘蛋白-Sepharose4B親和層析以及Sephacryl-S100分子篩等步驟,純化得到純度為95%以上的雷扎凝集素(簡稱OLL)。比活提高45.8倍,活力回收2.5%。雷丸凝集素是單一肽鏈的蛋白質,分子量為12kDa,等電點為7.5,可被半乳糖抑制。具有熱穩定性及酸堿(pH1~12)穩定性。2mmol/L氯化鋅可使其比活提高4倍。同兔血相比,與人血進行凝集反應,其比活可提高4倍。進行圓二光譜測定,α-螺旋和β-折疊含量較高。與半乳糖間的抑制反應瞬間內完成,且空間結構變得緊密。
          【基金】人事部留學回國人員科技活動基金;中國醫學科學院中國協和醫科大學青年科技人才基金;國家自然科學基金;
          【關鍵詞】赤霉菌; 原生質體; DNA轉化; 潮霉素B抗性基因;
           
           
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