【作者】陳福生 周啟 羅信昌 李書謙 王愛華 路磊
【機構】上教育部農業微生物重點實驗室 農業部食品安全評價重點開放實驗室 華中農業大學 教育部農業微生物重點實驗室 農業部食品安全評價重點開放實驗室 華中農業大學 農業部食品質量監督檢驗測試中心華中農業大學 農業部食品質量監督檢驗測試中心 華中農業大學 農業部食品質量監督檢驗測試中心 華中農業大學 武漢430070,武漢430070,武漢430070,武漢430064,武漢430064,武漢430064
【摘要】以黃曲霉毒素B1(AFB1)與牛血清蛋白(BSA)的連接物AFB1-BSA注射免疫兔子獲得抗AFB1抗血清,經(NH4)2SO4沉淀、酶切處理與親和層析分離純化后,得到抗AFB1獨特型抗體Ab1及其酶切片段Fab1,然后再將Fab1注射免疫BALB/c小鼠,得到抗(抗AFB1)獨特型抗體Ab2及其酶切Fab2。研究了Ab2和Fab2的性質,結果表明,Ab2和其Fab2都僅與Ab1及其Fab1反應,而不和抗桔霉素等其他抗體反應,有較好的特異性。以AFB1與卵清蛋白(OV)的連接物AFB1-OV為包被抗原,Fab1為反應抗體,Ab2和Fab2為競爭抗原,達到50%的競爭抑制率時,Ab2和Fab2的濃度分別為3.98ug/ml和1.12ug/ml;而以Ab2和Fab2為包被抗原,Fab1為反應抗體,AFB1為競爭抗原,達到50%的競爭抑制率時,AFB1的濃度分別為44.67ug/L和6.31ug/L,這表明無論是Ab2還是Fab2都和AFB1有很好的內影像關系,可以作為AFB1的替代品用于AFB1的免疫學檢測。但是相對而言,由于Fab2的分子量小,反應時的空間位阻小,所以Fab2更適合于用作AFB1的替代品。
【基金】湖北省科技廳重點課題(992p0321)； 教育部農業微生物重點實驗室開放課題(AML99023)；
【關鍵詞】黃曲霉毒素B1-牛血清蛋白（AFB1-BSA）連接物; 抗原; 親和層析;