【作者】劉陽 劉玉煥 陳志仕 廉婕 羅維佳 黃曉 鐘英長
【機構】中山大學生命科學學院中山大學生命科學學院 廣州510275
【摘要】米曲霉LY-128的培養物經硫酸銨分級沉淀,Sephadex G-100 凝膠過濾, DEAE-Sephrose CL-6B 和Sephadex G-100層析手段,獲得了電泳純的廣譜有機磷農藥水解酶。通過SDS-PAGE 和IEF電泳測得其分子量為62 kDa, 等電點為pH 5.2。該酶的最適反應溫度為45℃,最適 pH 6.8, 在50℃以下及pH6.0～9.5 范圍內活性穩定。Hg2+、Fe3+、對氯高汞苯甲酸、碘乙酸和N-乙基馬來酰亞胺對該酶有強烈的抑制作用,而Cu2+、 巰基乙醇、二硫蘇糖醇、二硫赤蘚糖醇、谷光甘肽和去污劑對酶有不同程度的激活作用。底物的專一性實驗表明,該酶不僅可以作用于含P-O鍵的有機磷農藥;而且也能水解含P-S鍵的有機磷農藥。以甲基對硫磷和內吸磷為底物的Km值分別為52祄ol、236 祄ol; Vmax分別為317祄ol min-1 mg-1、179 祄ol min-1 mg-1;Kcat分別為1152 s-1、650 s-1。
【基金】廣東省科技計劃項目(C32402)； 廣東省自然科學基金(031618)； 中山大學生物防治國家重點實驗室開放項目(0203)；
【關鍵詞】生物降解; 基本性質; 最適反應條件;