【作者】黃乾明 楊婉身 陳華萍 張寒飛 劉一江 謝君
【機構】四川農業大學生命科學與理學院華南農業大學測試中心 雅安625014廣州510642
【摘要】粗毛栓菌Trametes gallica誘變菌株SAH-12是通過紫外誘變選育所得的漆酶高產菌株,Active-PAGE分析表明SAH-12在高氮低碳無機鹽培養液(LM3)中至少分泌3種漆酶同工酶(Lac1、Lac2、Lac3)。采用硫酸銨鹽析、透析和Sephadex-G75分子篩層析從其培養液中分離純化得到電泳純的Lac1,純化倍數6.54,酶活性回收59.7%。Lac1經SDS-PAGE驗證為一條帶,其表觀分子量為61.5kDa。Lac1為一種糖蛋白,含糖量11.6%,等電點pI4.40,催化氧化底物ABTS的最適反應溫度為60℃,最適pH為2.6,Km值為25μmol/L。Lac1在40℃(pH4.0)以下和pH1.5～5.0(28℃)范圍內穩定。金屬離子Fe2+、Ag+、Hg2+和Cr3+與抑制劑DTT、SDS、EDTA和DMSO對Lac1有抑制作用,其中Fe2+和DTT完全抑制酶活,而Cu2+對酶有明顯激活作用,Mn2+、Zn2+對酶活影響不大。Lac1不僅可使一些合成染料明顯脫色,而且對蘋果汁多酚祛除也有較好效果。40℃用該酶(1U/mL)處理蘋果汁5h,其多酚含量可降低40%。
【基金】四川省教育廳重點科研項目(No.2002A009,No.2004A026)； 四川省科學技術廳應用基礎項目(No.04JY029-032)； 四川農業大學青年科技創新基金(No.00731200)；
【關鍵詞】合成染料; 脫色; 蘋果汁; 多酚;