【作者】王劍鋒 王璋 饒軍 李江 白濤
【機構】東華理工大學生物系中國食品發酵工業研究院東華理工大學生物系 撫州344000 中國食品發酵工業研究院北京100027
【摘要】煙管菌Bjerkandera adustaWZFF.W-Y11漆酶粗酶液經過丙酮分級沉淀、DEAE-Cellulose離子交換層析、Sephadex G-100凝膠過濾,得到了三種電泳純的漆酶同工酶,總酶活回收率達到65.5%,其中LacA平均純化了29.2倍,LacB純化了5.1倍,LacC純化了18.5倍;三種同工酶的分子量分別為LacA:68.7kDa、LacB:80.2kDa、LacC:77.2kDa。LacA、LacC氧化愈創木酚的Km大于氧化ABTS的Km,最適作用溫度在45-70℃,最適反應pH3.0-5.5,65℃時LacC比LacA穩定,LacC在pH3.5-6.0穩定,LacA在pH5.0-9.0穩定,Al3+對LacA、LacC的酶活有促進作用,Cl-、Fe3+、Hg2+抑制LacA、LacC的酶活,Cu2+抑制LacC的酶活,而對LacA的活性沒有明顯影響。
【關鍵詞】同工酶; 丙酮分級沉淀; 凝膠過濾; 愈創木酚;