【作者】王劍鋒 王璋 李江 饒軍
【機構】東華理工大學生物系中國食品發酵工業研究院
【摘要】根霉Rhizopus sp.A01發酵豆渣產α-半乳糖苷酶,粗酶液依次經過三相分離、Sephadex G-100凝膠過濾獲得了電泳純的α-半乳糖苷酶,純化了6.7倍,總酶活回收率達到46%;凝膠過濾和SDS-PAGE顯示該酶為相對分子質量為87.6kDa的單體蛋白。該酶水解對硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷的最適pH值為5.0,最適溫度為55℃,表觀Km、kcat/Km分別為2.56mmol/L、47,400L/mol·s;能微弱水解蜜二糖和棉子糖,水解蜜二糖的速率是水解棉子糖速率的3.4倍;水解活性受多種金屬離子的明顯抑制,其中Ca2+、Cu2+、Fe3+、Hg+、Mn2+等幾乎完全抑制酶活性。該酶活性在pH4.5-9.0保持穩定,在55℃時保溫120min,酶活殘留48%。
【關鍵詞】棉子糖; 蜜二糖; 對硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷; 三相分離;