栽培種的接種栽培種是直接用于生產的菌種,其培養基的配方與母種基本相同,所用容器也與母種相同。栽培種的接種是把母種轉接到培養基上進行擴大培養,選用優質母種,按無菌操作程序進行。接種時先將母種的瓶口移向酒精燈火焰上,去掉蓋子或棉塞,轉動瓶口,使瓶口的周圍都得到火焰滅菌,再用鑷子去除母種表面的菌膜,然后用鑷子或接種匙取母種塊到栽培種的培養基上,蓋上瓶蓋,貼好標簽,于22~24℃在培養室培養。一般一瓶母種可接栽培種40~70瓶(圖3.19)。
銀耳的母種只使用菌種的上層部分,越往瓶下部銀耳菌絲越少(主要是香灰菌菌絲),接種后影響出耳率。所以在使用銀耳母種時,要先把耳芽去掉,然后將上面1/3的菌種攪拌混勻,取混勻的菌種接入栽培種培養基表面即可。用于生產的銀耳栽培種使用時同樣只取菌種的上層部分。
(3)菌種污染的原因
菌種生產中,防止雜菌污染是母種和栽培種成敗的關鍵。造成雜菌污染的原因有以下幾種:
①在栽培種的接種塊上及周圍出現雜菌,而培養基的其他部位未發現任何雜菌,這可能是母種已被雜菌污染。所以要嚴格檢查母種的質量。
②瓶(袋)內培養基上、中、下不同的地方均出現雜菌,是由于培養基滅菌不徹底造成的。需要改善滅菌條件,改進滅菌方法。
③培養基表面出現雜菌,其他地方沒有污染。這可能是接種室(箱)消毒、滅菌不徹底,操作工具、手等消毒不嚴或棉塞太松,使得雜菌孢子從瓶口落入而造成的。
④棉塞上出現霉菌,然后蔓延到培養基內,這往往是由于棉塞過于潮濕引起的。
⑤菌種在培養后期,有時在培養基的表面出現雜菌,是由于培養室的環境不清潔,空氣中雜菌的孢子量過多,菌種瓶的瓶蓋或棉塞包扎不緊,雜菌孢子從縫隙侵入,造成培養后期的污染。
(4)菌種質量檢驗的目測指標
檢測菌種是為了判定所得的菌種是否為優良菌株;鑒定所分離得到的菌種或引進的菌種是否為所需要的菌種。否則誤用被污染了或老化的菌種或用錯了菌種,都會對生產造成很大損失。菌種檢驗的指標很多,這里介紹一下它的目測指標。以耳類菌種為例:
木耳原種菌絲白色,后略呈米黃色,似細羊毛狀,平貼培養基匍匐生長,菌絲短,前端整齊,生長速度為0.5厘米/天,13~15天長滿斜面。菌絲滿管后,菌落表面出現污黃色斑塊,并分泌色素,使培養基呈淺黃色至茶褐色。菌齡較長的原種,在斜面邊緣或底部出現膠質琥珀狀的原基。
毛木耳菌絲老化后,有紅褐色、珊瑚狀原基出現。
銀耳原種純銀耳菌絲白色,短而細密,菌絲先端生長整齊。在適宜培養基上生長,菌絲體開始呈斜立或直立狀,形成蓬松的白毛團,生長速度慢,日生長量為1毫米。培養一段時間后,在白毛團上可分泌白色或黃色水珠,形成淺黃色至黃色耳芽。
香灰茵茵絲原種菌絲白色,呈羽毛狀,短粗,有較強的爬壁能力,生長快,6~7天可長滿斜面,3~5天分泌黑褐色色素,使培養基變黑。菌絲老化時,表面菌絲呈淡黃褐色,并出現炭質黑疤圈。
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