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          對硫磷真菌降解酶的分離純化和性質


          【發布日期】:2018-01-16  【來源】:菌物學報
          【作者】劉玉煥 鐘英長
          【機構】中山大學生命科學學院生物化學系;
          【摘要】黑曲霉AspergillusnigerY-8在液體培養基中30℃培養5d,其菌體用超聲波破碎后,經硫酸銨沉淀、DEAE-纖維素層析、Sephadex-100凝膠過濾,得到凝膠電泳均一的對硫磷降解酶,其比活為6.94,提純倍數為13.6倍,收率為17.4%。酶作用的最適溫度是50℃,最適pH為7.5,在40℃以下和pH6.0~9.0之間穩定,此酶為單亞基蛋白,凝膠過濾法測得分子量為42000,含糖14.6%,SDS、Hg2+、Ag+、Fe3+對酶有強烈的抑制作用,金屬螫合劑EDTA對酶活無影響。此酶對甲基對硫磷、敵敵畏、亞胺硫磷也有較好的降解作用,當以對硫磷為底物時,Km為0.43mmol/L,Vmax為1.24μmol·mg-1·min-1。  
          【關鍵詞】黑曲霉; 對硫磷降解酶; 純化;
           
           
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