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          一種簡便、快速測定鵝膏多肽毒素的方法——抑芽法


          【發布日期】:2018-01-23  【來源】:菌物學報
          【作者】張志光 劉建強 張曉元 陳作紅 張在海
          【機構】湖南師范大學生命科學學院;
          【摘要】低濃度(5-10ngml-1)的鵝膏毒肽(amatoxins) 能專一性抑制RNA聚合酶Ⅱ的活性,高濃度(為RNA聚合酶Ⅱ103-104倍的濃度)也能抑制RNA聚合酶Ⅲ的活性,因而影響細胞mRNA的轉錄和蛋白質的合成,抑制種子的萌發和生長。根據此原理我們建立了一種以植物種子萌發試驗檢測鵝膏毒肽的方法,稱之為“抑芽法”(bud-inhibited assay)。該方法簡便、實用、準確。操作流程:45℃干燥至恒重的鵝膏菌等子實體菌蓋;水提法提取毒素并用氯仿沉淀蛋白質等;粗毒液濃度為0.025-0.05gml-1干子實體;蘿卜或綠豆種子培養溫度為28℃,培養時間為24-72h。綠豆芽下胚軸生長被抑制率在95%以上,可能為鵝膏毒肽含量高的劇毒鵝膏菌;當被抑制率在60-80%,可能為鵝膏肽含量較低的微毒鵝膏菌;當被抑制率在30%以下時,可能是不含鵝膏菌肽的鵝膏菌。 
          【基金】國家科技部重點課題資助項目;
          【關鍵詞】抑芽法; 鵝膏多肽毒素; 鵝膏菌; 綠豆種子; RNA聚合酶Ⅱ;
           
           
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