【作者】汪天虹 劉倜 劉世利 龍昊 劉謹
【機構】山東大學微生物技術國家重點實驗室山東大學微生物技術國家重點實驗室 濟南250100
【摘要】采將解除了葡萄糖阻遏的纖維素酶高產菌株瑞氏木霉TrichodermareeseiRutC30經EMS誘變后,在酪蛋白平板上篩選出部分蛋白酶缺陷突變菌株T.reeseiRutC30M3。RutC30M3的胞外蛋白酶活力比親本株降低約74%,但生長特性、產纖維素酶活力等性狀與親本株相同。用攜帶潮霉素磷酸轉移酶基因(hph)的表達質粒pAN7-1分別轉化瑞氏木霉RutC30和RutC30M3原生質體,轉化結果顯示RutC30M3(pAN7-1)對潮霉素的抗性比RutC30(pAN7-1)提高約20%,而Northernblot分析結果顯示在兩菌株中潮霉素基因轉錄水平相似,由此證明宿主菌蛋白酶缺陷對保護重組蛋白免于降解有明顯作用。蛋白酶缺陷菌株RutC30M3適于作為瑞氏木霉外源基因表達系統中的受體菌株用于大量生產同源與異源蛋白。
【基金】國家自然科學基金(批準號:30070014)； 山東省自然科學基金(批準號:Y2000D12)；
【關鍵詞】瑞氏木霉; EMS誘變; 蛋白酶缺陷株; 外源基因表達系統;