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          利用PEG法建立藥用真菌靈芝的轉化系統


          【發布日期】:2018-02-08  【來源】:菌物學報
          【作者】李剛 王強 劉秋云 李寶健
          【機構】中山大學基因工程教育部重點實驗室中山大學基因工程教育部重點實驗室 廣州510275
          【摘要】本文首次建立了一種通過PEG轉化緩沖液將外源基因轉入靈芝的方法,轉化頻率約為5~6個/mg(抗性轉化子/質粒+107個原生質體)。轉化子在不含HmB的培養基上經5代以上的繼代培養后仍可以穩定表達HmB抗性。Southernblot檢測證明外源基因已經整合到了靈芝的基因組DNA中。本研究為通過基因工程手段定向、快速改良靈芝藥用品質以及利用靈芝發酵方法生產一些具有重大經濟價值的外源蛋白等應用奠定基礎,并且也有助于我們進一步了解靈芝這一大型真菌中的基因的表達調控機制。 
          【基金】廣州市科技局靈芝重大攻關項目基金資助(2001-Z-006-01);
          【關鍵詞】原生質體; HmB; pAN7-1; 轉化效率;
           
           
           
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