【作者】張洪 丁可 裴國亮 郭軍 康振生
【機構】西北農林科技大學植物保護學院陜西省農業分子生物學重點實驗室
摘要:胞質游離鈣離子變化與植物病原真菌侵染寄主的動態過程具有重要的關聯性。本研究以侵染小麥葉片的條銹菌31號生理小種(CYR31)為材料,以孵育法將Ca2+熒光探針Fluo-3-AM載入到小麥條銹菌細胞中,并結合激光共聚焦掃描顯微技術,建立了測定侵染過程中條銹菌胞質游離Ca2+分布的試驗方法。結果表明,采用10μmol/L Fluo-3-AM裝載順次進行低溫4℃孵育1h,25℃孵育1h,可獲得較為理想的條銹菌胞質游離Ca2+染色結果。該方法可用于檢測不同侵染階段的小麥條銹菌細胞質游離鈣離子的分布變化,為進一步研究銹菌胞內鈣離子動態與侵染寄主的關聯性提供了技術支撐。
基金:國家自然科學基金(No.30671350); 教育部科學技術研究重點項目(No.107104); 教育部長江學者和創新團隊發展計劃項目(No.IRT0558); 高等學校學科創新引智計劃資助項目(No.B07049);
關鍵詞:熒光指示劑; 孵育條件; 最適溫度;