【作者】李興佳 農向群 曹廣春 劉迅 王廣君 張澤華
【機構】中國農業科學院植物保護研究所 農業部作物有害生物綜合治理重點實驗室
【摘要】為了能夠對金龜子綠僵菌在花生田間的存活能力進行精確的定量研究,通過比對真菌ITS序列,設計出針對金龜子綠僵菌的特異性引物,并建立金龜子綠僵菌Real-Time PCR反應體系。結果表明,標準品在拷貝數為8.49×103–8.49×109copies/μL之間,線性關系良好,線性方程為y=-3.257x+6.969,相關系數為R=0.9980,擴增效率E=102.8%,檢出痕量為20個孢子/g土壤。以Real-Time PCR方法和平板稀釋法,分別對花生根部施用金龜子綠僵菌后不同時期的土壤進行定量分析,結果表明兩種方法檢測的金龜子綠僵菌數量變化趨勢相似,施用的金龜子綠僵菌在根圍與根際都呈現先快速下降后緩慢回升的趨勢,90d時金龜子綠僵菌DNA量和CFU值均下降至初始的10%以下,之后出現回升;根際的金龜子綠僵菌相對地下降較慢而回升較快,在120d時可恢復到初始的52.17%和38.65%,顯著高于根圍的數量。試驗建立的Real-Time PCR體系可用于金龜子綠僵菌土壤宿存的定量檢測,而且適用于低含量的檢測。
【基金】公益性(農業)行業專項(No.201003025)； 農業部948計劃(No.2011-G4)； 現代農業產業體系(No.CARS-35)；
【關鍵詞】金龜子綠僵菌; 種群動態; 定量分析;