【作者】彭軼楠王沛雅鞏曉芳祝英楊暉王治業周劍平
【機構】甘肅省科學院生物研究所甘肅省微生物資源開發利用重點實驗室甘肅省科學院自然能源研究所
摘要：寡雄腐霉Pythium oligandrum是一種對動、植物和環境無害,兼具殺菌和增產效果的生防真菌。本研究以0.8mol/L甘露醇與25mmol/L CaCl2和10mmol/L Tris-HCl作為滲透壓穩定劑,使寡雄腐霉菌絲體在含有裂解酶、纖維素酶、破壁酶的復合酶系中酶解得到其原生質體。此原生質體通過液體振蕩培養的途徑恢復再生1d后涂于平板上可生長為成熟菌體。本研究所述方法制備得到的寡雄腐霉原生質體數量超過1×109CFU/m L,活性超過80%;通過液體培養再生途徑使得寡雄腐霉原生質體再生率達32.9%。此方法操作簡便,穩定性好,獲得的寡雄腐霉原生質體品質高、數量多,完全能夠滿足后期基因遺傳轉化、細胞融合培養等研究應用。
基金：國家國際合作專項項目(2013DFA30950)； 甘肅省基礎研究創新群體計劃(1606RJIA325)； 甘肅省科學院創新團隊(CX201601)； 甘肅省軟科學研究計劃(1205ZCRA170)~~；
關鍵詞：寡雄腐霉; 生防真菌; 原生質體; 制備及再生;