謝寶貴; 盧啟泉; 饒永斌; 孫淑靜; 鄭金貴
福建農林大學; 福建農林大學; 福建農林大學; 福建農林大學; 福建農林大學 福州350002; 福州350002; 福州350002; 福州350002; 福州350002
【中文摘要】 用PCR法合成人胰島素基因,克隆到pUC18載體上,經測序證實其堿基序列與人胰島素基因的序列完全一致。本實驗還構建了銀耳表達載體,由限制性內切酶介導(Restriction enzy me-mediated DNA Integration,REMI)轉化銀耳芽孢。隨機挑取21個抗性菌落,轉管繁殖2代后檢測其GUS活性,實驗結果:18個菌株陽性,3個菌株陰性。從這21個菌株中選取10個菌株,提取染色體DNA,用人胰島素基因、GUS基因和Tnos序列的特異引物進行PCR,結果表明,這10菌株都能擴增出相應長度的特異片段,證明了它們是人胰島素基因轉化子。
【中文關鍵詞】 人胰島素; 基因合成; 基因轉化; 銀耳; 芽孢
【基金】國家自然科學基金項目“銀耳生物反應器基礎研究”(No30471210);; 福建省衛生教育聯合攻關計劃項目“銀耳生物反應器生產人胰島素的研究”(NoWKL2005-2-009)的部分研究內容
【文獻出處】 食用菌學報,Acta Edulis Fungi,編輯部郵箱,2007年02期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2007-02-000