1、進行接種操作的相對潔凈區域或房間叫無菌室或叫接種室。無菌室達到—定的無菌程度，面積—般4—6平方米，高度2—2.2米。室內地面、墻壁平整光滑，水泥墻面涂刷油漆或防水、防霉涂料，也可裝貼塑面板和殺菌瓷面磚。無菌室的門要和工作臺保持—定距離，通常采用左右移動拉門，有條件裝用超凈工作臺，效果更好。
以化學滅菌消毒的無菌室稱為化學滅菌無菌室。食用菌栽培大多數采用這類無菌室。用過濾空氣凈化環境的無菌室用于機械、物理滅菌無菌室，也稱潔凈室。潔凈氣流分層流式和亂流式兩種，亂流式潔凈級別低，用于工業生產。食用菌接種室常在舊建筑上改造，需增添有技術走廊的亂流潔凈室。一般工作區要求空氣潔凈度達到100級，溫度23-25℃，相對濕度50-65％，水平層流速度0.3-0.5米／秒。
2、無菌室使用注意事項
?。?）使用前 ①用紫外線滅菌15-30分鐘，或用5％石碳酸、3％煤酚皂液噴霧后，再開紫外線燈滅菌；②用富爾馬林—甲醛熏蒸；③用臭氧發生器殺菌30分鐘后。三種方法交替使用，效果更好。一般使用10-30天后，再滅菌一次。應特別重視進入無菌室前的人身凈化和熟悉操作要求。
?。?）滅菌效果檢驗 方法是在室內一定高度放置若干葡萄糖瓊脂培養叢玻璃皿，順次打開皿蓋5分鐘，然后蓋上皿蓋，連同對照的玻璃皿一起放置到溫度為30℃的培養箱中培養3天，觀察菌落數。每個玻璃皿內雜菌落數超過3個為不合格。若有不合格的，應檢查重來，直到合格為止。
3、紫外線滅菌燈
用于滅菌的紫外線燈光裝置叫紫外線滅菌燈。紫外線分長波紫外線和短波紫外線，長波紫外線用于保健治療，短波紫外線用于滅菌。
?。?）滅菌原理。紫外線滅菌是當微生物菌體被紫外線照射并吸收了紫外線后，引起細胞內的氨基酸、原漿蛋白、酯的化學變化，使細胞變性，從而導致細菌死亡。
?。?）使用注意事項。紫外線屬低能量的電磁輻射，穿透力很差，影響紫外線滅菌的因素有：
?、倏諝庵械膲m粒與濕度。當空氣中含800-900個／立方米塵粒時，滅菌效果降低20-30％；當相對濕度由33％增至56％時，滅菌效果減為原來的1／3。
?、诃h境溫度。大多數燈管設計在25-40℃條件工作，如果外界溫度由27℃減低到4℃時，輸出能量要減低65-80％。
?、圩贤饩€對固體的穿透力。凡可見光不能穿透的物質，紫外線亦不能穿透，對聚氯乙烯薄膜開始可以透過30％以上，但是經6小時照射后，由于薄膜變性透過率<3％，因此，用紫外線滅菌、消毒僅限于被照射的物體表面和空氣。
?、茏贤饩€管要保持清潔。燈管上的灰污、油漬會減弱紫外線輻射量，應經常用酒精紗布擦凈，擦后也不能觸摸。燈管壽命約2000小時
必須定時更換。一般10-30平方米的房間需30瓦燈一支，照射30分鐘后，掛上遮光布30分鐘則效果更好，也防止對人體的危害。
4、臭氧發生器。紫外線照射空氣后會產生臭氧，產生臭氧的設備稱為臭氧發生器。
（1）滅菌機理。臭氧能使有機物氧化分解，是很有效的滅菌劑。臭氧滅菌的氣體擴散作用，對密閉的箱室內部無滅菌死角，所以滅菌速度比紫外線快1-2倍，比藥物快8-12倍。臭氧滅菌無殘毒，只需30-40分鐘臭氧就能自行還原成氧氣。對食用菌的生長和生育抑制也有效。（2）常用機型。國產常用的臭氧滅菌器有FCY系列環境消毒滅菌器和MQ系列消毒滅菌器。SS-2801系列空氣凈化器屬于空氣高壓電暈放電產生負離子和臭氧的設備，風速為1-2米／秒，適用于為接種室提供滅菌空氣、菇房滅菌、食品短期保鮮、人防工程空氣凈化等。
