高壓蒸氣滅菌，0.15兆帕下維持2—3小時。常壓滅菌，當溫度達100℃時維持10—12小時再悶12小時待自然溫度下降最好。高壓滅菌結束，讓壓力自動下降至零后，將袋取出運入接種室，冷卻到30℃以 要挑選好接種用的原種或栽培種。菌種首先檢查是否經過出菇試驗，證明是種性優良的菌種，逐袋撿出菌絲粗壯、潔白，有細粉狀，菌齡在35—40天，不超過45天。后期培養基表面出現成熟的白色子實體的正常優質菌種。剔除菌絲細弱，褐色分泌物多，粉狀分生孢子多的或污染上雜菌和發生螨類為害的不良菌種。
接種前，先將菌種、接種工具及料袋等放入接種室或接種箱消毒，每立方米空間用甲醛8—10毫升加高錳酸鉀5克熏蒸。接種室熏蒸10—12小時后接種。接種箱熏蒸半小時后就可接種。也可用氣霧消毒劑，按每立方米空間8克熏蒸消毒。
接種人員換上清潔衣鞋，用消毒液洗手和酒精洗手消毒進室接種，操作要輕快、迅速嚴格無菌操作。
接種是在酒精燈火焰周圍進行，袋子不要碰到火焰，以免燒熔塑料袋。袋口朝下，除接入少量菌種在料袋中央洞內，其余接在料面，分散均勻，接種量5%左右。一瓶原種接30袋左右。接好種后將栽培袋輕拿輕放移出接種箱，整齊排放在大棚內進行菌絲培養管理。
