外源抗藥性基因導入香菇體內的研究
Introduction of Foreign Drug-Resistant Gene into Lentinula edodes
閆培生 李桂舫 羅信昌 周啟
摘 要：利用PEG轉化法將攜有潮霉素抗藥性基因的質粒載體導入香菇原生質體內,獲得了抗性轉化子,但轉化率較低,每微克DNA僅有0.5個轉化子.點雜交證實,外源基因已整合到香菇染色體上;不同轉化子在抗性平板上生長速率不同,且轉化子有絲分裂是穩定的.香菇轉基因技術的成功,為利用該技術克隆香菇內源基因及啟動子,將外源有益目的基因導入香菇體內,為培育香菇基因工程菌株提供了可能.
關鍵詞：食用菌;香菇;遺傳轉化;基因工程
分類號：S646.12;Q78 文獻標識碼：A
文章編號：1005-9873(2002)01-06-04
基金項目：瑞典國際科學基金資助
作者單位：閆培生（華中農業大學農業部農業微生物重點實驗室,武漢,430070；萊陽農學院應用真菌研究室,萊陽,265200）
李桂舫（萊陽農學院應用真菌研究室,萊陽,265200）
羅信昌（華中農業大學農業部農業微生物重點實驗室,武漢,430070）
周啟（華中農業大學農業部農業微生物重點實驗室,武漢,430070）
參考文獻：
［1］閆培生,邊銀丙,羅信昌.高等真菌基因工程研究進展.食用菌學報,1997,4(2):47～53.
［2］閆培生.中國木耳屬菌株的分子鑒定及分子系統發育關系的研究:[學位論文].武漢:華中農業大學生命科學技術學院,1998.
［3］Farrnan ML, Oliver RP. The transformation of protoplast of Leptosphaeria maculans to hygromycin B resistance. Curr. Gent, 1988, (13) : 148～ 170.
［4］Jia JH, Buswell JA, Peberdy JF. Transformation of the edible fungi, Pleurotus ostreatus and Volvariella volvacea. Mycol. Res, 1997, (7): 876～880.
［5］Kistler HC,Benny UK. Genetic transformation of the fungal wilt pathogen Fusarium oxysporum. Curt. Gent,1988, (13): 145～ 149.
［6］Mooibroek H, Kuipers AGJ, Punt JH et al. Introduction of hygromycin B into Schizophyllum commune: preferential methylation of donor DNA. MGG, 1990, (222) :41～48.
［7］Royer JC, Horgen PA. Towards a transformation system for Agaricus bisporus . In Genetics and breeding of Agaricus (ed. L.J.L.D. van Griensen), 1991. 135～139.
［8］Sarnbrook J, Fritsch EF, Manitiatis T. Molecular cloning-A laboratory manual (2nd ed). Cold Spring Harbor Laboratory: Cold Spring Harbor, 1989.
［9］Yan PS, Luo XC, Zhou Q. Gene transfer system for the basidiomycetes. In: Proceedings of the China-Japan International Symposium on Mycology. Wuhan: Huanzhong Agricultural University, 1997.49～50.
