【作者】張永軍方衛國金凱羅志兵周永洪肖月華裴炎
【機構】農業部生物技術與作物品質改良重點實驗室重慶市農業生物技術重點實驗室西南農業大學生物技術中心農業部生物技術與作物品質改良重點實驗室重慶市農業生物技術重點實驗室西南農業大學生物技術中心 重慶400716
【摘要】根據幾種絲狀真菌FUS3/KSS1類MAPK的保守序列設計簡并引物,從昆蟲病原真菌球孢白僵菌中擴增出MAPK基因的部分片段,進而利用YADE法延伸該片段的上、下游鄰接序列,獲得MAPK基因的全長序列,命名為BbMPK1。用3′RACE擴增出BbMPK1的全長cDNA序列,該序列含有一個1071bp的ORF,編碼356個氨基酸的多肽,推測分子量為41.2kDa,等電點為6.61。BbMPK1含有11個MAPK共有的蛋白激酶區域和1個MAPK激酶作用的磷酸化位點區域(TEY),其氨基酸序列與絲狀真菌的TMKA、PMK1、CMK1、FMK1和BMP1等MAPK高度同源。系統聚類結果表明,BbMPK1屬于酵母FUS3/KSS1類MAPK。Southern雜交表明,BbMPK1在球孢白僵菌基因組中以單拷貝形式存在。RT-PCR分析表明BbMPK1在分生孢子休眠階段、萌發階段和菌絲生長時期均表達。研究結果為闡明酵母FUS3/KSS1類MAPK同源基因在球孢白僵菌中的作用奠定了基礎。
【基金】國家重點基礎研究計劃(973)項目(2003CB114203)； 國家高技術研究發展計劃(863)項目(2002AA214051)； 重慶市教委項目(20204)；
【關鍵詞】信號傳導; 致病性; 昆蟲病原真菌;