【作者】蘇豫陳依軍車永勝劉鋼
【機構】中國藥科大學化學生物學研究室軍事醫學科學院毒物藥物研究所抗毒藥物與毒理學國家重點實驗室中國科學院微生物研究所真菌學國家重點實驗室
【摘要】己糖激酶在真菌中廣泛存在,參與葡萄糖磷酸化等生理過程。本文從頭孢菌素產生菌頂頭孢霉中克隆并鑒定了一個己糖激酶編碼基因,命名為Achka。通過RT‐PCR證明Achka含有4個內含子,其推測的編碼蛋白含有484個氨基酸,分子量為53.7k Da。在頂頭孢霉中敲除Achka后發現,突變株在以果糖、蔗糖或甘露糖為唯一碳源的培養基上生長受到嚴重限制。我們在大腸桿菌中異源表達了Achka,并對表達的重組蛋白AcHKA進行了分離純化。酶學動力學分析表明,AcHKA對果糖的最大反應速率要大于葡萄糖,但是卻對葡萄糖有更高的親和力。上述結果進一步證明AcHKA為己糖激酶,在頂頭孢霉體內主要負責果糖、蔗糖和甘露糖等的代謝。
【基金】國家自然科學基金(31470177)~~；
【關鍵詞】頂頭孢霉; 己糖激酶; Achka; 己糖利用;