【作者】劉建雨 劉建輝 張丹 徐珍 王瑞娟 楊慧 于海龍 尚曉冬
【機構】上海市農業科學院食用菌研究所 農業部應用真菌資源與利用重點開放實驗室,國家食用菌工程技術研究中心 上海市農業遺傳育種重點實驗室
摘要:將釀膿鏈球菌(Streptococcus pyogenes)Cas9序列(SpCas9序列,Addgene#43802)根據金針菇(Flammulina velutipes)的密碼子偏好性進行優化,并構建FvCas9雙元表達載體,利用農桿菌介導法轉化金針菇單核體Dan3,經抗性培養基篩選以及潮霉素和Cas9基因PCR擴增驗證,結果顯示Cas9基因已經成功轉入金針菇菌絲體中,轉化率為6.84%。
基金:上海市市級農口系統青年人才成長計劃項目[滬農青字(2017)第1-13號]; 上海市市級農口系統青年人才成長計劃項目[滬農青字(2017)第1-11號]; 上海市科技興農重點攻關項目[滬農科攻字(2015)第5-1號]資助;
關鍵詞:金針菇; 農桿菌介導法; CRISPR/Cas9系統; Cas9;