【作者】李梅 吳小波 李萌 呂聰 董旭杰 曹福祥
【機構】中南林業科技大學生命科學與技術學院 湖南省環境資源植物開發與利用工程技術研究中心
摘要:以漆酶活性為指標,利用不同果皮為基質對糙皮側耳(Pleurotus ostreatus)固態發酵產漆酶的條件進行優化并對所產漆酶進行純化,研究純化后漆酶的酶學性質。結果表明:以柚皮為培養基質(5g柚皮、25mL水、20μL吐溫-80),30℃固態發酵10d,糙皮側耳產漆酶的活性最高,比活力為21800U/g;在該條件下將糙皮側耳所產漆酶的粗酶液用硫酸銨沉淀、透析、濃縮、DEAE-纖維離子交換柱層析得到漆酶蛋白單一條帶,SDS-PAGE檢測蛋白相對分子質量約66000;該漆酶命名為Lac h2,其最適反應溫度為60℃,最適反應pH值為4.5;在30~50℃,pH 4.5~6.0范圍內穩定;金屬離子Zn2+、Mn2+、Cu2+和Mg2+對純化的漆酶Lac h2的酶活力有促進作用而Ca2+、Ag+和Fe2+對Lac h2的酶活力有抑制作用。
基金:湖南省科技廳重點研發項目(2016NK2143);
關鍵詞:漆酶; 柚皮; 純化; 酶學性質;