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          一種基于細胞計數技術的羊肚菌單孢子菌種分離方法


          【發布日期】:2019-01-29  【來源】:中國食用菌
          【作者】鄒振平 王婷婷 袁通闊 樓瑩瑩 王一東
          【機構】長春理工大學生命科學技術學院
          摘要:為了獲取羊肚菌(Morchella esculenta)單孢子菌種,利用經無菌處理的羊肚菌孢子懸液,經細胞計數板計數后稀釋至每100微升含2個、1個、0.5個孢子,分別加入96孔細胞培養板培養孔中,鏡檢觀察各孔中的孢子數并標記出含單個孢子的培養孔。室溫下培養,待單孢子孔中孢子萌發的菌絲生長至培養孔底部邊緣時,將菌絲轉移至PDA平板中培養,對培養得到的菌絲進行ELISA鑒定,確定分離得到羊肚菌單孢子菌種,然后將菌種進行編號,擴大培養并保存。利用該方法分離得到3株羊肚菌單孢子菌種,分別編號為LG-01、LG-02、LG-03。
          基金:長春理工大學大學生創新創業訓練計劃項目(2015S054; 2016S093); 吉林省教育廳“十三五”科學技術研究項目(吉教科合字[2016]第384號);
          關鍵詞:羊肚菌; 單孢子菌種; 細胞計數; 酶聯免疫吸附法(ELISA);
           
           
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