【作者】耿雪冉 張巧毅 常明昌 徐麗婧 程艷芬 王賀祥
【機構】山西農業大學食品科學與工程學院 黃土高原食用菌提質增效協同創新中心 湖南農業大學東方科技學院 中國農業大學農業生物技術國家重點實驗室
【摘要】依次采用離子交換層析（DEAE-Cellulose、CM-Cellulose和SP-Sepharose）和凝膠過濾層析（Superdex75 HR10/300 GL）從三色雷蘑（Leucopaxillus tricolor）子實體中分離純化得到一種核糖核酸酶（Ribonuclease,RNase）。該酶比活為1406 U/mg,純化倍數為154,通過HPLC-LTQ-Orbitrap測序得到4條肽段序列,分別為DMAVSYLSR、IGLSSIPR、ILGRFVVDTYK和SGKANAATPK。該核糖核酸酶的相對分子質量為15000,最適反應pH為9.0,最適反應溫度為40℃,熱穩定性高,80℃孵育1 h后能保持90%以上的活性:Cu2+、Ca2+、Mn2+、Cd2+和Al3+在1.25～10 mmol/L濃度下對該酶活性具有抑制作用,且抑制作用隨著金屬離子濃度的升高而變強;Fe2+在1.25～5 mmol/L的濃度下,Pb2+、Zn2+、Mg2+、Hg2+、Fe3+在1.25～2.5 mmol/L的濃度下對該酶的活性有促進作用。
【關鍵詞】酶活力; 氨基酸序列; 相對分子質量; pH; 溫度; 金屬離子;