筆者在進行麥粒菌種制種實踐中摸索出一套新技術,即對瓶裝麥粒培養基進行固定,防止麥粒培養基在菌種瓶側放時與棉塞接觸,并在麥粒培養基中間鉆一通氣-接種孔直達菌種瓶底部,接種時同時在通氣-接種孔底部和麥粒培養基表面接種菌種。
與常規制種方法相比,麥粒培養基被固定在菌種瓶中后,在滅菌、接種和搬運過程中將菌種瓶側放時,菌種瓶中的培養基不會發生移動,培養基和棉塞不能相互接觸,避免了培養基中的水分通過接觸而傳導至棉塞,使棉塞和封口紙始終能保持干燥狀態。因雜菌孢子不可能在干燥的封口紙上萌發,這樣棉塞和封口紙就能對空氣中的雜菌孢子發揮阻隔作用,有效防止培養基受雜菌污染,麥粒菌種的雜菌污染率由3%以上降至0.2%左右。
在培養基中間鉆有通氣接種孔,便可將菌種同時接種在培養基底部和上部,菌種在培養基的上下層同時萌發生長,既可省去老法制種中搖動培養基來分散菌種的工作,又達到縮短培養時間和降低能耗之目的,使菌種在溫室的培養時間縮短約1/3,溫室培養過程中的能源消耗節省近1/3。
現將食用菌麥粒培養基鉆通氣-接種孔固定培養技術介紹如下。
一、麥粒培養基的制備
(一)麥粒培養基的配方小麥粒99%,碳酸鈣1%。
(二)麥粒培養基的制作和裝瓶小麥粒淘洗干凈后用清水浸泡12小時,然后沸煮15分鐘,撈出攤開晾干表面水分后拌入碳酸鈣并裝入菌種瓶,一般裝至瓶肩以下1.5~2CM即可。
二、麥粒培養基的固定和鉆孔
(一)固定用料的配制固定用料采用木屑培養基,其配方為:闊葉樹木屑78%,麥麩20%,蔗糖、石膏粉各1%,水適量。原料按比例混合均勻,加水量掌握在用手緊握木屑培養基時手指縫間有水滲出但不下滴的程度為宜。
(二)麥粒培養基的固定方法在菌種瓶的麥粒培養基上面裝滿木屑培養基,然后用扁鐵鉤向下壓實、整平。木屑培養基用量以壓實、整平后剛好達菌種瓶的瓶肩部為宜。
(三)在麥粒培養基中鉆通氣-接種孔用直徑1.2~1.5的尖頭圓木棍從培養基表面中間向瓶底鉆一通氣-接種孔。鉆孔需反復多次才可鉆成。第1次鉆孔后再向瓶中裝入少量木屑培養基,并用鉆孔棍邊鉆孔邊撥入孔中。每次鉆孔后退出木棍時邊旋轉邊退,避免將孔壁上的培養基拉松。如此反復3~4次,直至培養基中間形成由木屑培養基構成的較牢固的孔壁。最后再用扁鐵鉤對培養基表面稍加整壓。
?。ㄋ模┚N瓶的清洗和封口將菌種瓶瓶口向下斜放入清水中,清洗瓶外壁和培養基以上的瓶內壁上附著的木屑培養基。待瓶口水分干后在瓶口上塞入棉塞,并用牛皮紙包扎瓶口。
三、培養基的滅菌
將瓶裝麥粒培養基裝入高壓蒸汽滅菌鍋內滅菌,在1.5KG/CM2壓力、121~126℃的溫度下滅菌2小時。
四、接種和培養
在接種箱內接種。接種時挖取花生粒至蠶豆粒大的菌種塊,分別接種到處理通氣-接種孔底部和培養基表面。接種后置于溫室中在27℃的恒溫下培養,15~18天后菌絲即可長滿全瓶。
五、適用范圍
此法適宜于進行瓶裝的食用菌麥粒菌種制種。塑料袋裝的麥粒菌種因塑料袋外壁柔軟,固定好的麥粒培養基易在滅菌、接種和搬運過程中因碰撞、擠壓而變形,難以保持固定狀態,因此不適用此法制種。