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          大杯傘柄多糖與菌絲體粗多糖的免疫識別方法初探


          【發布日期】:2016-03-09
          【作者】 鄭恒光; 陳君??; 湯葆莎; 吳俐; 翁敏劼; 高慧穎; 
           
          【Author】 ZHENG Hengguang;CHEN Junchen;TANG Baosha;WU Li;WENG Minjie;GAO Huiying;Research Institute of Agri-Engneering Technology,Fujian Academy of Agricultural Sciences;
           
          【機構】 福建省農業科學院農業工程技術研究所; 
           
          【摘要】 采用熱水(80℃)提取和75%乙醇沉淀、Sepharose CL-4B凝膠過濾及DEAE Sepharose CL-4B陰離子交換等方法分離純化大杯傘(Clitocybe maxima)柄粗多糖,獲得傘柄多糖純品,制備多糖抗體;采用熱水法提取大杯傘菌絲體粗多糖。用碳二亞胺法將純化傘柄多糖與牛血清白蛋白進行共價化學偶聯,并將偶聯產物(擬糖蛋白)免疫兔子以制備抗血清,以酶聯免疫法檢測抗體滴度。依據該抗體與來自相同菌株的菌絲體粗多糖免疫反應差異對這兩種多糖進行免疫識別,結果表明:經過親和層析純化后,第六次免疫抗血清對傘柄多糖的抗體滴度可達64K,而且對菌絲體粗多糖反應呈陰性,顯示該抗體可識別這兩種多糖之間的結構差異。 更多還原
           
          【關鍵詞】 大杯傘; 傘柄多糖; 菌絲體粗多糖; 分離純化; 抗體制備; 免疫識別; 
          【文內圖片】
          【基金】 福建省自然科學基金(編號:2010J01275);農業部公益性行業(農業)科研專項(編號:201303080)的部分研究內容
           
           
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