【機構】華北制藥集團新藥研究開發有限責任公司 華北制藥集團新藥研究開發有限責任公司 石家莊050015
【摘要】本研究以四種不同物種來源,不同代謝途徑功能基因的啟動子為材料,分別構建了以產黃青霉異青霉素N合成酶(IPNS)基因pcbC的啟動子Pipns、構巢曲霉3-磷酸甘油醛脫氫酶基因gpdA的啟動子PgpdA、構巢曲霉色氨酸合成基因trpC的啟動子PtrpC、粗糙脈胞霉氨基酸合成交叉途徑控制基因cpc的啟動子Pcpc為啟動子,腐草霉素(phleomycin)抗性基因為報告基因,構巢曲霉色氨酸合成基因trpC的終止子TtrpC為終止信號的絲狀真菌轉基因質粒,建立了產黃青霉工業生產菌種啟動子篩選、評價體系,調查了這四種啟動子的強弱。結果表明選擇性標記基因受強啟動子驅動可以提高產黃青霉工業生產菌種的轉基因效率。研究也顯示這四種啟動子的強弱的順序為PgpdA、Pcpc、Pipns和PtrpC。
【基金】國家高技術研究發展計劃(863計劃)(2003AA001005)； 國家科技攻關計劃(2002BA711A16)； 國家技術創新項目計劃資金資助；
【關鍵詞】調控元件; 抗性基因; 轉化效率;
載體結構圖
產黃青霉菌轉化子 PCR 分析 (引物 ph1 和 ph2 擴增結果)