鏈格孢菌原生質體的制備與限制性內切酶介導整合(REMI)轉化的致病性誘變

【作者】伏建國 強勝 朱云枝

【機構】南京農業大學雜草研究室 南京農業大學雜草研究室 南京210095

【摘要】以鏈格孢菌Alternariaalternata菌株NEW為供試菌株,研究了菌齡、酶系統、酶解時間、酶解溫度及穩滲劑對鏈格孢菌原生質體制備的影響。結果表明,制備鏈格孢菌原生質體比較適宜的條件為PD液體培養基培養20h,以0.7mol/LNaCl為穩滲劑、1%LysingEnzyme、1%Drislase和1%Snailase3種酶溶液混合使用,30℃酶解3h。對原生質體進行了限制性內切酶介導整合(REMI)轉化,篩選到了鏈格孢菌弱致病突變株NEW001,為致病相關基因的標記和克隆打下了基礎。 

【基金】國家863項目(2001AA246012)； 國家自然科學基金(30170619)資助；

【關鍵詞】制備原生質體適宜條件; 致病性變異; 弱致病突變株;