栽培種由原種轉擴而成，一瓶原種可擴接40瓶（袋）栽培種。栽培種所用培養基與原種相同。但所用容器取決出菇菌袋的接種方式。用手掰塊點種（慶元式接種法），栽培種應選用袋裝。值得注意的是瓶裝發菌僅需30天即可滿瓶，而袋裝則需40~45天才能滿袋，采用不同容器發菌，其接種時間應事先安排好。選用袋裝制栽培種，種袋規格以15×30×0.05聚丙烯塑料袋為宜，并用無棉蓋體封口。袋裝栽培種培養基滅菌時間要比瓶裝多滅2小時以上，滅菌才能徹底。
菌袋接種后，應隨時觀察發菌情況，并檢出雜菌瓶（袋）。檢測菌種（包括母種、原種）方法：
1、菌絲潔白粗壯，生長快，長勢好，爬壁力強。
2、打開瓶（袋）塞后有濃郁香菇氣味，培養料呈淺黃色，塊狀，挖后菌絲復活快。
3、菌絲無萎縮、離壁現象。
4、菌絲無厚菌皮或褐變、黑變現象。菌絲出現厚菌皮、褐變、黑變皆是菌絲老化特征，接種成功率僅達60~75%。出現褐變、黑變菌塊菌絲一般不宜接種。最具生活力，接種成功率最高時期的菌齡菌種是菌絲剛發滿瓶（袋）后至剛剛出現星點狀原基，這一時期的菌種發菌成功率幾乎可達100%。為了使用生活力最強菌種，栽培種應根據生產計劃及進度分3~5批制備。
