5.4 拌料
拌料的目的是使主料、輔料和水充分混拌均勻。拌料水分應略大一點，以袋底“發黑”、有幾毫米的水漬為好。
5.5 裝袋
小孔栽培要提高裝袋的標準，培養料不但要裝實，更要上下松緊一致，料面平整無散料，袋料緊貼，塑料袋無褶皺。提高裝袋的質量，關鍵是所用的裝袋機的好壞，建議使用防爆裝袋機。
5.6 封口
采用免頸圈法或菌棒法封口。
5.7 滅菌
培養基配制后應在4小時內進鍋滅菌。木屑培養基滅菌0.12Mpa,1.5h或0.14Mpa-0.15Mpa,1h,谷粒培養基0.14Mpa-0.15Mpa,2.5h。裝容量較大時，滅菌時間要適當延長。滅菌完畢后，應自然降壓，不應強制降壓。常壓滅菌時，在2h之內使滅菌室溫度達到100℃，保持100℃8h-10h。
5.8 出鍋
出鍋時要趁熱將菌筐搬到冷卻室或接菌室，剛出鍋的菌袋發軟易變形，造成袋料分離，要等菌袋稍涼變硬后再從菌筐中揀出。
5.9 接種
5.9.1 接種室（箱）的基本處理程序
清潔→搬入菌袋（瓶）→接種室（箱）的消毒處理→接種
5.9.2 接種室（箱）的消毒方法
用藥物消毒并用紫外燈照射。
5.9.3 接種操作
在無菌室（箱）中嚴格按無菌操作接種，接種完成后及時貼好標簽。
5.9.4 接種室（箱）后處理
接種室每次使用后，要及時清理清潔，排除廢氣，臺面要用75%酒精或新潔爾滅溶液擦拭消毒。
5.10 養菌
5.10.1 培養室處理
培養室每年用石灰水徹底粉刷一次,在使用的前兩天,采用藥物消毒,菌種培養期間使用來蘇水或新潔爾滅進行空氣消毒.
5.10.2 培養條件
5.10.2.1 溫度
原種和栽培種最適生長溫度為22℃-25℃.在菌種培養過程中注意室溫、堆溫、料溫的變化，以料溫恒定22℃-25℃為基準，控制室溫變化。一般情況下，菌種萌發期，室溫控制在26℃-28℃，生長期室溫控制在22℃-25℃，菌種培養后期室溫控制在16℃-20℃。
5.10.2.2 通風
隨著培養時間的加長，菌絲量的增加，逐漸增加通風量。培養前期少通風或不通風，培養后期多通風。
5.10.2.3 濕度
空氣相對濕度40%左右。
5.10.2.4 光照
避光培養。
5.10.3 培養期的檢查
各級菌種培養期間應定期檢查，及時檢出不合格菌種。
