【作者】蘇文英盛立柱代月婷宋冰付永平李玉
【機構】吉林農業大學農學院食藥用菌教育部工程中心龍泉市食藥用菌產業辦公室
摘要：凝集素在食用菌的生長發育、抗病蟲等逆境及抗腫瘤等方面發揮著重要的作用,但是關于糙皮側耳凝集素基因的抗逆功能研究還比較薄弱。因此,本文利用PCR技術克隆得到糙皮側耳子實體凝集素polectin2基因及其啟動子序列,測序和生物信息學結果顯示該基因不含內含子,完整開放閱讀框為408bp,編碼136個氨基酸,預測蛋白分子量15.3k Da;啟動子polectinpro序列長度為927bp,生物數據庫PLACE分析結果表明polectinpro含有低溫、干旱脅迫誘導和病程相關等抗逆元件。然后,構建含有GFP融合蛋白的重組植物表達載體pCAMBIA1302-polectinpro-gfp,并進行煙草遺傳轉化,結果證明該啟動子能夠在低溫誘導下驅動gfp基因表達。同時成功構建了含有polectin2的重組植物表達載體pCAMBIA1301-polectin2并進行了煙草遺傳轉化;對陽性轉化植株T1代和野生型種子進行低溫脅迫實驗,結果表明轉基因種子萌發率明顯高于野生型。綜上所述,推測polectin2基因具有耐低溫功能,且其啟動子具有低溫誘導活性。上述結果為進一步利用子實體凝集素polectin2基因提高食用菌的耐低溫等抗逆功能提供了理論依據和技術支持。 還原
基金：公益性行業(農業)科研專項(201503137)； 973項目(2014CB138305)； 吉林省秸稈綜合利用技術創新平臺(吉高平合字[2014]B-1)； 吉林農業大學校內啟動基金(2015007)； 吉林省科技發展項目(20140101148JC)~~；
關鍵詞：糙皮側耳; 凝集素基因; 低溫; 功能驗證; 轉化植株;