【作者】章先 方云 付子賢 周一釗 方維煥 宋厚輝
【機構】浙江農林大學動物科技學院中澳動物健康大數據分析聯合實驗室動物健康檢測互聯網技術浙江省工程實驗室浙江大學動物科學學院浙江省檢驗檢疫科學技術研究院
摘要：黃曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）在自然界普遍存在,可污染多種糧食作物和飼料,給動物和人類健康造成嚴重威脅。為建立AFB1高靈敏度的快速檢測方法,本研究通過采用納米金顆粒（Au nanoparticles,AuNPs）和辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase,HRP）雙標記AFB1單克隆抗體,建立新型酶聯免疫檢測方法（HRP-AuNPs IC-ELISA）,檢測下限（IC10）為0.017ng/mL,檢測區間(IC20–IC80)為0.026–0.376ng/mL,半數抑制率(IC50)為0.099ng/mL,與黃曲霉毒素B2、G1、G2和M1的交叉反應率分別為2.7%、9.3%、2.1%和5.3%,與赭曲霉毒素A、伏馬毒素B1、桔青霉素、展青霉毒素和玉米赤霉烯酮幾乎不存在交叉反應。在玉米和面粉樣本中的加標回收率可達88.93–103.55%,與LC-MS/MS同時對天然樣本中AFB1含量進行檢測,結果表明,兩種方法相關性良好。本研究建立的HRP-AuNPs IC-ELISA耗時短且靈敏度高,可用于實際樣本中AFB1的快速定量檢測與分析,也為其他霉菌毒素的精準檢測技術開發提供參考。
基金：浙江省自然科學基金(LQ17C170002)； 浙江農林大學人才項目(2016FR025)； 浙江省重點研發計劃(2018C02041)； 國家高新技術研究發展計劃(863計劃)(2012AA101602)~~；
關鍵詞：黃曲霉毒素B1; 納米金顆粒; 辣根過氧化物酶; 單克隆抗體;