【作者】曾鈺 熊亮 李潔 DENHAAN Riaan 趙心清 白鳳武
【機構】上海交通大學生命科學技術學院大連理工大學生命科學與技術學院Department of Biotechnology,University of Western Cape
摘要：異源蛋白質分泌效率低限制了重組釀酒酵母的多種藥用蛋白和工業酶生產。挖掘促進蛋白質生物合成和分泌的關鍵基因,是提高異源蛋白質生產效率的重要手段。釀酒酵母細胞壁完整性影響異源蛋白質分泌,本研究利用基于CRISPR/Cas9的基因組編輯技術,破壞了重組釀酒酵母Y294-BGL1中參與細胞壁合成的未知功能基因UTH1,發現所獲得的突變體胞外β-葡萄糖苷酶酶活比出發菌株提高112.9%,而細胞壁完整性下降。對促進產酶的分子機理進行探索,發現突變體產酶條件下與細胞壁完整性相關的關鍵基因和與蛋白質分泌途徑相關的基因轉錄出現明顯差異,提示UTH1基因破壞不僅影響細胞壁完整性關鍵基因的表達,也影響蛋白質分泌途徑。本文的研究結果有助于深入理解UTH1的基因功能,并為構建異源蛋白質高分泌酵母菌株提供了借鑒。
基金：國家自然科學基金(31461143029； 51561145014)~~；
關鍵詞：纖維素酶; 釀酒酵母; β-葡萄糖苷酶; UTH1基因; 細胞壁完整性;