【作者】馬超君 王剛正 周莎莎 羅義 龔鈺華 邊銀丙
【機構】華中農業大學植物科學技術學院應用真菌研究所
摘要：鄰氨基苯甲酸合酶(Trp E)是生物體內一種重要的逆境誘導蛋白,其在逆境條件下的響應保證了生物體生存相關產物的正常代謝。本文以香菇Lentinula edodes栽培菌株S606為試驗材料,以Le Trp E功能結構保守區域395bp的反向互補片段為干擾片段,構建Letrp E基因雙向啟動子RNAi載體;采用根癌農桿菌介導轉化法侵染香菇菌絲,通過PCR方法檢測DNA插入片段,獲得11個陽性轉化子;實時熒光定量PCR分析結果表明,2個轉化子Letrp E基因表達量較野生型菌株下調了2–3倍,確認其為Letrp E基因RNAi轉化子;菌絲體在40℃高溫處理24h后,檢查到吲哚-3-乙酸合成途徑中基因Le Tam-1在野生菌株S606表達量上調,而在2個RNAi轉化子中表達量下調;RNAi轉化子菌絲體在25℃下不能恢復生長,而野生型菌絲體可以恢復生長。研究表明,香菇Letrp E基因的功能與耐熱性有關。
基金：國家自然科學基金(34116162)； 湖北省技術創新專項重大項目(2016ABA100)~~；
關鍵詞：香菇; 高溫脅迫; 耐熱性; 鄰氨基苯甲酸合酶; 轉化子;